Amboisen goottilaista tyyliä edustava linna oli aikoinaan tärkeä kuninkaitten huvipalatsi, joka oli huomattavasti suurempi kuin nykyinen linna. Linnaan kuului valtavia italialaistyylisiä maisemapuutarhoja. Leonardo da Vinci kutsuttiin vuonna 1516 Amboisessa olevaan Ranskan hoviin ja hän asui kuningas Frans I:n vieraana linnan läheisyydessä olevassa Clos – Lucen kartanossa. Leonardo da Vinci kuoli 2.5.1519 ja hänet haudattiin toivomuksensa mukaisesti linnan puutarhassa olevaan 1400-luvulla rakennettuun Saint Hubertuksen kappeliin. Ludvig XIV:n aikana linna oli vankilana.